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●半定量●：是将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果，是一个比值差异的统计学分析。 ●内部参照●：内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白（Housekeeping Proteins），它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。

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●使用 RIPA 提取的总蛋白总结●： 1. 并非是真正意义上的总蛋白，相当一部分蛋白丢失在弃去的不可溶组分中。 2. 很多常用的内参，如 Actin，tubulin，LaminA，H3 等均在 RIPA 不可溶组分中被丢失。 3. 目标蛋白可能会在 RIPA 不可溶组分中被丢失，也可能不被丢失，具有不可预见性，非选择性。 4. 同种蛋白在不同样品中丢失的情况并不相同，蛋白丢失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和内参比值做校正会出现偏差，不适合 WB 目的蛋白的半定量分析。

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编辑：小檀20180918