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    酶联免疫检测法检测原理以及本方法的优点? ● 原理:酶联免疫吸附试验法的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。 再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 ● 优点:具有很高的特异性;另一方面由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性;ELISA法还具有简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,且适用于大批量标本的检测。

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    ●分析数据的处理:● 通常,测定工作获得一系列有关数据以后,需按以下原则记录、运算和处理。 1、记录与运算规则 主要说明食品分析中数据记录与计算,其均按有效数字计算法则进行,即: ① 除特殊规定外,一般可疑数为后一位,有±1个单位的误差; ② 复杂运算时,其中间过程可多保留一位,后结果需取应有的位数; ③ 加减法计算的结果,其小数点以后保留的位数,应与参加运算各数中小数点后位数小的相同; ④ 乘除法计算的结果,其有效数字保留的位数应与参加运算各数中有效数字位数少者相同; 2、可疑值的取舍 同一样品进行多次测定,常发现个别数据与其他数据相差较大,对这些不如意的数据不能任意弃去。除非分析者有足够的理由确证这些数值是由于某种偶然过失或外来干扰而剔除外,否则都应当依据误差理论来确定这些数据的取舍。 3、标准曲线绘制 用吸光光度法、荧光光度法、原子吸收光度法、色谱分析法对某些成分进行测定时,常常需要制备一套具有一定梯度的系列标准溶液,测定其系数(吸光度、荧光强度、峰高),绘制标准曲线。在正常情况下,此标准曲线应该是一条通过原点的直线,但在实际测定时,常出现某一、二点偏离直线的情况,这时,用小二乘方回归法绘制标准曲线,就能得到合理的图形。小二乘法计算,然后按回归方程式计算结果,绘制标准曲线。 4、测定结果的校正 在食品分析中,常常因为系统误差,使测定结果高于或低于检测对象的实际含量,即回收率不是100%,所以需要在样品测定的同时用加入回收法测定回收率,再利用回收率按下式对样品的测定结果加以校正。

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    编辑:小檀20180917

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