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●使用 RIPA 提取的总蛋白总结●： 1. 并非是真正意义上的总蛋白，相当一部分蛋白丢失在弃去的不可溶组分中。 2. 很多常用的内参，如 Actin，tubulin，LaminA，H3 等均在 RIPA 不可溶组分中被丢失。 3. 目标蛋白可能会在 RIPA 不可溶组分中被丢失，也可能不被丢失，具有不可预见性，非选择性。 4. 同种蛋白在不同样品中丢失的情况并不相同，蛋白丢失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和内参比值做校正会出现偏差，不适合 WB 目的蛋白的半定量分析。

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细胞凋亡发生时，内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA，但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割，单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构，可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 原理：●细胞凋亡的发生，是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。

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编辑：小檀20180910